Diagnostyka erytrocytów




Obecnie opracowano metody przygotowywania diagnostyki erytrocytów o długim okresie trwałości. Ich aktywną zasadą są antygeny wyekstrahowane z różnych mikroorganizmów, które uwrażliwiają krwinki czerwone.

Zasada przygotowania diagnostyki erytrocytów jest następująca: odwłókniona krew ludzka O (1) grupy lub owiec jest filtrowana przez gazę i przemywana trzy razy w wirówce z chłodzoną solą fizjologiczną. Następnie czerwone krwinki są przetwarzane z formaliną. Przygotowuje się zawiesinę zawierającą 12,5% czerwonych krwinek, umieszcza się w niej plastikową torebkę z formaliną i wstrząsa na maszynie do wysięgnika przez 16 godzin. W pierwszych 2 godzinach formaliny przedostaje się przez pory celofanu, a następnie zostaje przebity i ostatecznie pęknięty. Ta technika pozwala na początku powoli i stopniowo zwiększać wpływ formaliny na krwinki czerwone. Pod koniec okresu wytrząsania krwinki czerwone ponownie przesącza się przez gazę, przemywa 6 razy dziesięciokrotną objętością soli fizjologicznej schłodzonej do 4-5 ° C przy 2500-3000 obr./min, łączy się z równą objętością sterylnego obojętnego roztworu soli i wlewa do fiolek. W tej postaci sformalizowane krwinki czerwone mogą być przechowywane do roku. W przyszłości, w zależności od rodzaju antygenu, te krwinki czerwone są dodatkowo traktowane taniną lub łączone z antygenem bez tego leczenia.

Tak więc, w celu przygotowania diagnostyki erytrocytów błonicy i tężca, sformalizowane erytrocyty przemywa się raz solą fizjologiczną (pH 7,2), rozcieńcza do stężenia 2,5%, dodaje równą objętość taniny w rozcieńczeniu 1: 20000, wstrząsa i utrzymuje w temperaturze pokojowej przez 15 minut . Następnie krwinki czerwone przemywa się 3 razy pięcioma do sześciu objętościami soli fizjologicznej (pH 7,2). Sprawdzają brak spontanicznej aglutynacji, przygotowują 2,5% zawiesinę, do której dodaje się oczyszczone, skoncentrowane toksoidy - błonicę (10–20 Lf na mililitr zawiesiny) lub tężec (5–10 EC na mililitr zawiesiny).

Mieszaninę utrzymywano w 37 ° C przez 3 godziny. Godzinę przed końcem inkubacji dodać 1% formaliny, wstrząsnąć ciecz, aż utworzy się jednolita zawiesina. Po tym okresie krwinki czerwone przemywa się ponownie trzy razy obojętnym roztworem soli fizjologicznej zawierającym 1% formaliny. Przemyte uczulone erytrocyty rozcieńcza się solą fizjologiczną buforowaną fosforanem (pH 7,0) z formaliną (1%), tak że 0-8 ml zawiesiny zawiera 6-8 milionów erytrocytów (zliczonych w komorze Goryaev). W preparacie sprawdzana jest gęstość zawiesiny, brak spontanicznej aglutynacji, specyficzna aktywność z odpowiednimi surowicami odpornościowymi. Do kontroli stosuje się erytrocyty, traktowane w ten sam sposób, który nie jest uczulony antygenem.


border=0


Okres przechowywania diagnostyki erytrocytów tężca i błonicy wynosi 6 miesięcy.

Przy wytwarzaniu tularemii erytrocytów diagnoza erytrocytów formalinizowanych jest uczulana antygenem otrzymanym metodą Bohwen i Mesrobean z suszonych bakterii tularemii.

Do formułowania reakcji stosuje się 2,5% zawiesinę uczulonych erytrocytów. Aktywność leku jest sprawdzana w reakcji pośredniej hemaglutynacji z aglutynującą surowicą antytrywialną. Jeśli uczulone erytrocyty aglutynują z tą surowicą, rozcieńczając ją mniej niż podano w instrukcji - diagnoza erytrocytów jest odrzucana.

Okres ważności leku wynosi 9 miesięcy.

Oprócz powyższych antygenów do diagnostyki epidemii tyfusu plamistego i szczurzego antygenu riketsji przygotowano z płuc białych myszy zakażonych rickettsiami Provaček i Muzera.

Bogate w chybotliwe płuca myszy rozkrusza się w moździerzu piaskiem kwarcowym i rozcieńcza solą formalinową w ilości 3-4 ml na płuco.

Następnie, formalinizowaną zawiesinę odwirowuje się dwukrotnie: raz przy 1500 obrotach na minutę, aby usunąć zanieczyszczenia tkanek, innym razem przy 3000 obrotach na minutę, aby uzyskać riketsje w osadzie. Osad traktuje się solanką zawierającą 0,4% formaliny i 0,5% fenolu.

Następnie poddaje się go działaniu eteru, po czym dodaje się do niego sacharozę i suszy się ze stanu zamrożonego w warunkach wysokiej próżni.

Gotowy produkt jest suchym antygenem z dobrze oczyszczonej riketsji zabitej formaliną, poddanej kontroli zgodnie z metodą opisaną powyżej.





; Data dodania: 2018-01-21 ; ; Wyświetleń: 296 ; Czy opublikowany materiał narusza prawa autorskie? | | Ochrona danych osobowych | PRACA ZAMÓWIENIA


Nie znalazłeś tego, czego szukałeś? Użyj wyszukiwania:

Najlepsze powiedzenia: Możesz kupić coś na stypendium, ale nie więcej ... 8069 - | 6582 - lub przeczytaj wszystko ...

2019 @ edudoc.icu

Generowanie strony ponad: 0,001 sek.